Аллерген туберкулезный рекомбинантный раствор

Приказом Минздравсоцразвития РФ от 29 октября 2009 г. N 855 настоящее приложение дополнено приложением N 2

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении (далее – препарат) представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT. Препарат содержит два связанных между собой антигена – CFP10 и ESAT6, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза, в том числе M.tuberculosis и M.bovis. Эти антигены отсутствуют в штаммах БЦЖ M.bovis, из которого готовятся вакцины туберкулезные – БЦЖ и БЦЖ-М. Одна доза (0,1 мл) препарата содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 (0,2 мкг), фенол (0,25 мг) в качестве консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорно-кислый однозамещенный, воду для инъекций – до 0,1 мл.

Биологические и иммунологические свойства.

Препарат предназначен для повышения качества диагностики туберкулезной инфекции. Действие препарата основано на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для микобактерий туберкулеза (далее – МБТ) антигены.

Препарат не обладает сенсибилизирующим действием, не токсичен. При внутрикожном введении вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа (далее – ГЗТ).

По результатам проведенных исследований установлено, что чувствительность (частота положительных ответных реакций у лиц с активной туберкулезной инфекцией) внутрикожной пробы с препаратом сопоставима с чувствительностью туберкулиновой пробы, а его специфичность (частота отсутствия реакции на препарат у здоровых лиц) выше, чем у туберкулина, так как в отличие от туберкулина у вакцинированных БЦЖ, но не инфицированных МБТ лиц, препарат не вызывает ответную реакцию ГЗТ. В связи с тем, что препарат не вызывает реакцию ГЗТ, связанную с вакцинацией БЦЖ, проба с препаратом не может быть использована вместо туберкулинового теста для отбора лиц на первичную вакцинацию и ревакцинацию БЦЖ.

Препарат используется во всех возрастных группах с целью:

1) диагностики туберкулеза и оценки активности процесса;

2) дифференциальной диагностики туберкулеза;

3) дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии (гиперчувствительности замедленного типа);

4) наблюдения за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

Для практического использования внутрикожную пробу с препаратом применяют в противотуберкулезных учреждениях или, при отсутствии таковых, по назначению врача-фтизиатра и при его методическом обеспечении.

Для раннего выявления туберкулеза внутрикожную пробу с препаратом проводят:

лицам, направленным в противотуберкулезное учреждение для дообследования на наличие туберкулезного процесса;

лицам, относящимся к группам высокого риска по заболеванию туберкулезом с учетом эпидемиологических, медицинских и социальных факторов риска;

лицам, направленным к фтизиатру по результатам массовой туберкулинодиагностики.

Факторами высокого риска заболевания туберкулезом являются:

1) эпидемиологические (контакт с больным туберкулезом человеком или животным);

сахарный диабет, язвенная болезнь, психоневрологическая патология, частые ОРВИ в анамнезе;

хронические заболевания различных органов и систем при торпидном, волнообразном течении и неэффективности традиционных методов лечения

длительный прием (более месяца) цитостатических, глюкокортикоидных препаратов, иммунодепрессантов;

ВИЧ-инфекция, перинатальный контакт у детей по ВИЧ-инфекции.

алкоголизм, наркомания, пребывание в местах лишения свободы, безработица;

беспризорность детей и подростков, попадание детей в детские приюты, детские дома, социальные центры и т.д.;

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и других заболеваний внутрикожную пробу с препаратом проводят в комплексе с клинико-лабораторным и рентгенологическим обследованием в условиях противотуберкулезного учреждения.

Для наблюдения за пациентами, состоящими на учете у фтизиатра с различными проявлениями туберкулезной инфекции в условиях противотуберкулезного учреждения (все контингенты ПТД) внутрикожную пробу с препаратом проводят при контрольном обследовании во всех группах диспансерного учета с интервалом 3-6 месяцев.

Способ применения и дозировка.

Назначение и методическое руководство проведением пробы осуществляет врач-фтизиатр. Проба проводится детям, подросткам и взрослым специально обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных тестов. Препарат вводят строго внутрикожно. Для проведения пробы применяют только туберкулиновые шприцы и тонкие короткие иглы с косым срезом. Перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Запрещается применять шприцы, предназначенные для инъекций инсулина.

Резиновую пробку флакона с препаратом обрабатывают 70% этиловым спиртом. Для забора препарата из флакона используется тот же шприц, который будет использован для инъекции (СП 3.3.2342-08 от 03.03.2008) Если туберкулиновые шприцы имеют съемные иглы, пробку флакона прокалывают отдельной иглой для подкожных или внутримышечных инъекций, которую после каждого забора препарата в шприц оставляют в пробке, накрыв стерильной салфеткой. Туберкулиновым шприцем набирают 0,2 мл (две дозы) препарата, и выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Флакон с препаратом после вскрытия допускается хранить не более 2 часов в защищенном от света месте.

Пробу проводят обследуемым в положении сидя. После обработки участка кожи на внутренней поверхности средней трети предплечья 70% этиловым спиртом в верхние слои натянутой кожи, параллельно ее поверхности, вводят 0,1 мл препарата. При постановке пробы, как правило, в коже образуется папула в виде “лимонной корочки” беловатого цвета диаметром 7-10 мм. Если на одном предплечье ставилась проба с туберкулином, препарат вводят в другое предплечье.

Лицам, у которых в анамнезе имелись проявления неспецифической аллергии, пробу рекомендуется проводить на фоне приема десенсибилизирующих препаратов в течение 7 дней (5 дней до постановки пробы и 2 дня после нее).

Учет и интерпретация результатов.

В учетных документах после постановки пробы с препаратом отмечают:

а) название препарата;

б) предприятие-изготовитель, номер серии, срок годности;

в) дату проведения пробы;

г) результат – реакция на пробу.

Результат пробы оценивает врач или обученная медсестра через 72 часа с момента ее проведения путем измерения поперечного (по отношении к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой. Гиперемию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата.

Ответная реакция на пробу считается:

отрицательной – при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии “уколочной реакции”;

сомнительной – при наличии гиперемии без инфильтрата;

положительной – при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.

Условно различают следующие ответные кожные реакции на препарат:

слабо выраженная – при наличии инфильтрата размером до 5 мм.

умеренно выраженная – при размере инфильтрата 5-9 мм;

выраженная – при размере инфильтрата 10 мм и более;

гиперергическая – при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата.

В отличие от реакции ГЗТ, кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48-72 ч обычно исчезают.

Отрицательная реакция на пробу.

Кожная ГЗТ к препарату, как правило, отсутствует:

1) улиц, не инфицированных МБТ;

2) у лиц, ранее инфицированных МБТ с неактивной туберкулезной инфекцией.

3) у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изменений при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструментальных и лабораторных признаков активности процесса;

4) у лиц, излечившихся от туберкулеза.

Одновременно проба с препаратом может быть отрицательной у больных туберкулезом с выраженными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования МБТ, на ранних стадиях туберкулезного процесса, у лиц, имеющих сопутствующие заболевания, сопровождающиеся иммунодефицитным состоянием. В связи с этим при наличии характерных клинико-рентгенологических признаках туберкулеза отрицательная реакция на препарат не должна препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулезной инфекции.

Лица с сомнительной и положительной реакцией на препарат подлежат обследованию на туберкулез.

Лица старше 18 лет, у которых впервые установлена сомнительная или положительная проба с препаратом, подлежат полному клинико-рентгенологическому обследованию в противотуберкулезном диспансере. По итогам обследования, при отсутствии у указанной группы лиц признаков локального туберкулеза, им показано наблюдение у фтизиатра по “0” группе диспансерного учета с проведением лечебно-профилактических мероприятий (по показаниям).

Детям и подросткам при наличии сомнительной или положительной реакции на препарат показано полное обследование на туберкулез с последующим лечением и наблюдением в соответствующей группе диспансерного учета. При отрицательном результате реакции на препарат лечение по поводу туберкулезной инфекции не показано. Повторная постановка пробы – через 2 месяца.

Противопоказания для постановки пробы:

1) острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания за исключением случаев подозрительных на туберкулез;

2) соматические и др. заболевания в период обострения;

3) распространенные кожные заболевания;

4) аллергические состояния;

В детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

В случаях дифференциальной диагностики локального туберкулеза и других заболеваний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, противопоказаний для постановки пробы с препаратом не имеется.

У отдельных лиц, как и при проведении туберкулинодиагностики, могут наблюдаться кратковременные признаки общей неспецифической реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры тела.

Взаимодействие с другими лекарственными препаратами.

Здоровым лицам с отрицательным результатом пробы профилактические прививки (кроме БЦЖ) можно проводить непосредственно после оценки и учета результата пробы.

Если профилактические прививки уже проведены, то пробу с препаратом осуществляют не ранее, чем 1 месяц после прививки.

Содержимое (Table of Contents)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Аллерген туберкулезный ФС.3.3.1.0001.15

рекомбинантный в Взамен ГФ Х, ст. 706,

стандартном разведении ФС 42-19ВС-86

Настоящая фармакопейная статья распространяется на аллерген туберкулезный рекомбинантный, который представляет собой гибридный белок с молекулярной массой около 27 кДа, состоящий из 2 антигенов CFP10-ESAT6, продуцируемый генетически модифицированной культурой Еscherichia соli BL21(DE3)/pCFP-ESAT.

Аллерген туберкулезный рекомбинантный предназначен для диагностики туберкулеза.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство препарата аллергена туберкулезного рекомбинантного должно осуществляться с соблюдением установленных правил организации производства и контроля качества генно-инженерных иммунобиологических лекарственных средств, гарантирующих качество и безопасность для человека.

Выращенную культуру клеток бактерий-продуцентов отделяют от среды и лизируют для высвобождения белка. Лизат клеток-продуцентов проходит стадии хроматографического выделения и очистки целевого белка-концентрата. Очищенный концентрат – полуфабрикат (субстанция) аллергена туберкулезного подлежит проверке на стерильность, отсутствие сенсибилизирующих свойств, содержание белка, специфичность, специфическую активность, аномальную токсичность. Стандартное разведение аллергена получают путем разведения концентрата изотоническим фосфатным буферным раствором до содержания 0,2 мкг гибридного белка в 0,1 мл.

ИСПЫТАНИЯ

Бесцветная прозрачная жидкость без посторонних примесей.

рН

В 0,1 мл препарата должно содержаться 0,2 мкг аллергена туберкулезного рекомбинантного. Индекс специфической активности должен быть равен (1,00 ± 0,05). Испытание проводят на морских свинках, зараженных живой культурой Mycobacterium tuberculosis.

Морских свинок (альбиносов или белокожих Hartley) массой (350±50) г содержат на постоянном пищевом рационе и в одинаковых условиях окружающей среды. Сенсибилизацию проводят путем заражения животных подкожно или аэрогенно вирулентным штаммом M. tuberculosis. Используют третью генерацию тест-штамма с плотной среды для выращивания микобактерий. Морских свинок используют для постановки проб не более 2 раз в период от 30 до 120 сут после инфицирования с интервалом между постановками проб не менее 30 сут. При повторном использовании животных пробы ставят на участках кожи, ранее не подвергавшихся воздействию препаратов.

За 24 ч до постановки туберкулиновых проб шерсть на спине или боках морских свинок удаляют сплошной полосой шириной 3-4 см.

Испытание препарата проводят на 6 зараженных микобактериями туберкулеза морских свинках. Заполняют 4 шприца испытуемым образцом и 4 шприца разведенным (0,2 мкг/0,1 мл) стандартным образцом (СО) аллергена туберкулезного рекомбинантного. Каждой морской свинке по методу случайных чисел вводят по 0,1 мл внутрикожно 4 пробы испытуемого образца и 4 пробы СО. Реакцию учитывают через 24 ч, измеряя 2 взаимно перпендикулярных диаметра эритемы в мм. Подсчитывают суммы реакций на испытуемый препарат и на СО. Специфическую активность оценивают по индексу специфической активности (I) – отношению суммы реакций на испытуемый препарат к сумме реакций на разведенный СО при отсутствии достоверных различий между средними реакциями на испытуемый препарат и СО. Если полученные результаты выходят за указанные пределы, испытание повторяют. Результаты 2 испытаний усредняют.

Морские свинки, иммунизированные вакциной БЦЖ, не должны реагировать на внутрикожное введение 0,2 мкг в 0,1 мл испытуемого аллергена туберкулезного рекомбинантного и давать положительные реакции – папулы диаметром не менее 5 мм на 2 ТЕ в 0,1 мл СО очищенного туберкулина. Испытание проводят на 3 морских свинках не ранее чем через 30 дней после введения им по 0,5 мг вакцины БЦЖ.

Рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT — прототрофный штамм E. coli В (депонирован в ИБХ РАН), который обладает рядом характеристик, отличающих его от штамма предшественника: быстрый рост на минимальной среде, способность к синхронизации, устойчивый рост культуры в условиях биосинтеза белка и недостатка питательных веществ, дефектность системы рестрикции ДНК В-типа. Штамм несет оригинальную плазмиду pCFP10-ESAT6, содержащую генетическую конструкцию из 2 генов M. tuberculosis – cfp10 и esat 6 и ген устойчивости к ампициллину (bla). Штамм устойчив к ампициллину (100 – 150 мкг/мл) и чувствителен к остальным антибиотикам.

Для контроля качества препарата используют тест-штаммы M.tuberculosis (вирулентный) и M. bovis BCG — 1 из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов.

Упаковка и маркировка

При температуре от 2 до 8 о С в условиях, исключающих замораживание. Допускается транспортирование при температуре не выше 18 °С в течение 15 дней.

При температуре от 2 до 8 °С. Не замораживать!

Используемый в диагностических целях аллерген туберкулёзный рекомбинантный в стандартном разведении известен под названием Диаскинтеста. Это предназначенный для введения под кожу раствор, содержащий белок генетически изменённых культур бактерии E. coli. Тест используют в диагностике туберкулёза, в результате у пациента развивается иммунный кожный ответ, считающийся признаком заболевания.

Описание и показания к применению

Рассматриваемый тест позволяет оценить реакцию человека на введение антигенов туберкулёза, произведённых чистой, генетически изменённой культурой кишечной палочки. Он несёт в себе белки, содержащиеся в вирулентных формах туберкулёзной бактерии, но отсутствующие в БЦЖ-вакцине.

Разовая доза инъекции – всего 0.1 миллилитра.

В ней содержится:

• 2 микрограмма туберкулёзного рекомбинантного белка;
• 46 мг соли хлорида натрия;
• 3876 миллиграмм фосфорнокислого натрия;
• 063 микрограмма фосфорнокислого калия;
• 005 микрограмма компонента полисорбата;
• 25 миллиграмма вещества фенола;
• около 0.01 мл подготовленной воды инъекционной.

Форма фабричного выпуска диаскина – 3-миллилитровые флаконы из стекла, поставляемые пачками от 1 до 10 штук. Каждая ёмкость закрыта резиновой пробкой, обкатана колпачком из алюминия, что позволяет обнаружить, вскрывалась ли ампула. После выпуска средство пригодно для использования на протяжении двух лет, если хранилось правильно: в температурных условиях от 2 до 8 градусов, в сухом и защищённом от света месте. Подвергать заморозке препарат нельзя.

Инструкция устанавливает, что с момента вскрытия ампулы её содержимое должно быть использовано не позднее, чем через 120 минут.

Необходимо строго соблюдать требования срока пригодности! Применять тест после его истечения нельзя, продукт подлежит утилизации.

Механизм действия – возникновение у носителей туберкулёза особого иммунного ответа организма на введённые антигены. При наличии микобактерий разовьётся кожная реакция, являющаяся признаком болезни.

Диаскин показан всем группам людей для диагностики туберкулёза внутрикожным методом. Тестирование позволяет оценить стадию патологического процесса, если тот активен, и риски выхода болезни из латентного состояния, если микобактерии в организме пока пассивны.

Этой методикой пользуются при дифференциальной диагностике, чтобы отличить туберкулёз от других патологий со схожими симптомами. Ею же оценивают, насколько эффективно проводимое лечение.

Следует помнить, что Диаскин нельзя использовать в качестве замены туберкулиновой пробы для выявления граждан, нуждающихся в первичной вакцинации БЦЖ (или ревакцинации), поскольку белок не вызывает нужного вида реакции.

Исследование с применением туберкулёзного белка, назначают группам пациентов:

• лицам, направленным в тубдиспансер для дополнительной диагностики;
• находящимся в группе повышенного риска по этой патологии;
• гражданам, получившим после туберкулинового исследования направление к фтизиатру.

Использование препарата как метода дифференциальной диагностики проводится комплексно, вместе с другими процедурами – рентгеноскопией и прочими техниками клинико-лабораторных исследований.

Ещё одно показание к аллергопробе – наблюдение за состоянием лиц, пребывающих на фтизиатрическом учёте. С интервалом от 3 месяцев до полугода в противотуберкулёзном учреждении проводятся контрольные обследования, в том числе и этим методом.

Применение

Каксказано ранее, Диаскинтест – лекарство для внутрикожного использования. Средство должен вводить только медицинский персонал, прошедший специальное обучение и владеющий соответствующими техниками. Диагностика любым пациентам, будь то дети или взрослые, проводится только по врачебному назначению. Средство впрыскивается под кожу при помощи специального туберкулинового шприца, оснащённого короткой иглой с косым срезом.

Обязательно следует проверить, не истёк ли срок годности как у раствора, так и у шприцов! При использовании просроченных средств есть серьёзный риск развития осложнений.

Методика проведения:

• человека следует усадить;
• врач набирает две полных дозы вещества в шприц (что составляет 0.2 миллилитра);
• далее часть выпускается в стерильный медицинский тампон из ваты, чтобы осталось ровно 0.1 миллилитра (объём контролируется по разметке шприца);
• участок кожи на внутренней части предплечья (в средней трети такового) обрабатывают медицинским спиртовым составом;
• доктор натягивает кожный покров и вводит иглу в верхние слои, по направлению параллельно поверхности;
• производится инъекция раствора.

У большинства людей сразу после процедуры образуется маленькая, в районе 7-10 миллиметров, папула беловатого цвета, напоминающая лимонную корочку.

Терапия начинается за 5 дней перед назначенной датой исследования, и продолжается ещё два дня потом. Медикаменты в каждой конкретной ситуации выбирает доктор.

Интерпретация результатов

Говорить об итогах теста данным лекарством можно спустя 72 часа после процедуры, результат оценивает доктор или подготовленная медицинская сестра. Критерием служит поперечный размер образовавшейся области гиперемированной ткани и папулы. Величина измеряется в миллиметрах с помощью прозрачной линейки; учёт пятна покраснения делают лишь при полном отсутствии инфильтрата.

1. Отрицательная. Нет покраснения, папула не обнаруживается, или же размеры образований не более 2 миллиметров в диаметре.
2. Сомнительная. Папула не видна, но есть гиперемированная область более 2 мм.
3. Положительная. У пациента имеется зона инфильтрата диаметром 2-14 миллиметров.

Различают степени ответа:

• у больного слабая реакция – папула 2-5 миллиметров;
• эффект умеренный – в пределах 5-9 миллиметров;
• гиперергические явления (сильно выражен ответ) – около 10, и до 14 миллиметров. Она также может сопровождаться лимфаденитом или везикуло-некротическими тканевыми изменениями.

Если результат проверки положителен или вызывает сомнения, человеку даётся направление на дополнительные диагностические исследования.

Есть вероятность полного отсутствия реакции, отрицательная говорит о:

• здоровье человека – в его организме микобактерий нет;
• излечении пациента от туберкулёза;
• возможной начальной стадии болезни или недавнем инфицировании;
• неактивной форме инфекции у заражённых патогеном.

В некоторых случаях демонстрируется отрицательная реакция у лиц на финальной стадии излечения. Противоположный фактор – тяжёлый туберкулёз, сопровождающийся иммунопатологическими нарушениями, тогда тест не покажет правильных данных. Некоторые сопутствующие заболевания, такие, как ВИЧ, влияют на состояние иммунитета и способны исказить данные.

Проводя диагностику, врач должен внести в документы название лекарства, где и кем оно было произведено, серию и номер, а также срок годности. Записывается дата тестирования и место, куда был сделан укол. По результатам в бумаги вносится эффект от инъекции.

Побочные действия и дополнительная информация

Несмотря на относительную безопасность лекарства, некоторым обратившимся к врачу его не назначают или делают это с осторожностью:

• не используют инъекции аллергена туберкулёзного рекомбинантного лицам, имеющим хронические инфекционные патологии в фазе обострения, и острые расстройства аналогичного происхождения – за исключением ситуаций, когда врач подозревает у подопечного туберкулёз;
• противопоказанием служат соматические расстройства в острой стадии;
• при эпилепсии;
• некоторых кожных болезнях;
• при различных подтверждённых аллергиях.

Не применяется Диаскин в детских учреждениях, если те находятся на карантине. После снятия последнего запрет снимается.

Рассматриваемый белковый препарат в основном безопасен, но может конфликтовать с компонентами других прививок, поэтому постановку можно делать до вакцинации или через месяц после проведения таковой. Информация о побочных эффектах от передозировки действующим веществом на сегодняшний день отсутствует.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Кривохиж В.Н., Королюк Александр Михайлович

В статье рассмотрены клинические симптомы и возможные причины непредвиденных местных и системных реакций у детей в возрасте от 2 до 11 лет после проведения кожной пробы с аллергеном туберкулезным рекомбинантным (АТР, Диаскинтест®). Этот препарат содержит слитый генно-инженерный белок ESAT6 /CFP10 кишечной палочки. Аллерген введен в России в практику превентивной диагностики туберкулеза с 2009 года. Нежелательные эффекты у детей развивались в промежутке от 1 часа до 12 часов после проведения кожной пробы с АТР в виде местных, а также не опасных для жизни системных реакций: повышения температуры тела до 39°С в течение суток, появления обширного болезненного отека в области предплечья, сопровождавшегося гиперемией, а в отдельных случаях и герпетиформными пузырьковыми высыпаниями на коже. Через 72 часа в месте введения аллергена наблюдался умеренного размера инфильтрат (папула), окруженный большой зоной гиперемии. Наиболее вероятными механизмами развития описанных симптомов гиперчувствительности немедленного типа авторы считают анафилактические реакции III типа (иммунокомплексные) и/или антителонезависимые анафилактоидные реакции на генноинженерный белок ESAT6 /CFP10, а также другие компоненты бактериального синтеза или среды культивирования E. coli. Для предупреждения возможного развития более серьезных реакций рекомендуется наблюдать пациентов не менее 15 минут после проведения кожной пробы с Диаскинтестом и быть готовыми к принятию таких же мер, как при анафилаксии.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Кривохиж В.Н., Королюк Александр Михайлович

Risk of Unexpected Adverse Effects Resulting from the Use of a Skin Test with Recombinant Tuberculosis Allergen in Children

This report reviews clinical cases, and their possible causes of unexpected local and systemic adverse effects associated with a novel skin test using recombinant tuberculosis allergen (RTA, Diaskintest) in 2-1 1 years old children. This preparation consists of a M. tuberculosis ESAT6 / CFP1 0 fusion protein produced in E. coli, and, in Russia, it has been used as a tool for preventive screening for tuberculosis since 2009. The most common side effects developed within 1 to 12 h after injection and were represented as local or non-life threatening systemic symptoms: fever up to 39°C lasting up to 24 h, painful excessive edema with reddening on the forearm, and, sometimes herpes-like blisters on the skin. In 72 h, the papula at the injection site was moderate, but the hyperemia around it was considerable. We argue that the most likely reason for this type of response could be the development of Type III hypersensitivity (associated with immune complexes), and/or antibody-independent anaphylactoid response to the ESAT6 / CFP1 0 protein or contaminating bacterial culture components. To prevent possible side effects, we recommend to observe the patients for not less than 1 5 min after the injection of RTA, and to be ready to respond in case of anaphylaxis development.

В ПОМОШЬ ПРАКТИЧЕСКОМУ ВРАЧУ

Риск развития у детей непредвиденных побочных реакций на аллерген туберкулезный рекомбинантный

В. Н. Кривохиж, А. М. Королюк

ГБОУ ВПО Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет Минздрава России, г. Санкт-Петербург

В статье рассмотрены клинические симптомы и возможные причины непредвиденных местных и системных реакций у детей в возрасте от 2 до 11 лет после проведения кожной пробы с аллергеном туберкулезным рекомбинантным (АТР, Диаскин-тест®). Этот препарат содержит слитый генно-инженерный белок ESAT6/CFP10 кишечной палочки. Аллерген введен в России в практику превентивной диагностики туберкулеза с 2009 года. Нежелательные эффекты у детей развивались в промежутке от 1 часа до 12 часов после проведения кожной пробы с АТР в виде местных, а также не опасных для жизни системных реакций: повышения температуры тела до 39°С в течение суток, появления обширного болезненного отека в области предплечья, сопровождавшегося гиперемией, а в отдельных случаях и герпетиформными пузырьковыми высыпаниями на коже. Через 72 часа в месте введения аллергена наблюдался умеренного размера инфильтрат (папула), окруженный большой зоной гиперемии. Наиболее вероятными механизмами развития описанных симптомов гиперчувствительности немедленного типа авторы считают анафилактические реакции III типа (иммунокомплексные) и/или антителонезависимые анафилактоидные реакции на генноинженерный белок ESAT6/CFP10, а также другие компоненты бактериального синтеза или среды культивирования E. coli. Для предупреждения возможного развития более серьезных реакций рекомендуется наблюдать пациентов не менее 15 минут после проведения кожной пробы с Диаскинтестом и быть готовыми к принятию таких же мер, как при анафилаксии.

Risk of Unexpected Adverse Effects Resulting from the Use of a Skin Test with Recombinant Tuberculosis Allergen in Children

V. N. Kryvohizh, A. M. Korolyuk

Saint-Petersburg State Pediatric Medical University, Ministry of Health of the Russian Federation

Контактная информация: Королюк Александр Михайлович — д.м.н., профессор, заведующий кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии Санкт-Петербургского государственного педиатрического медицинского университета МЗ РФ; г. Санкт-Петербург, 1 94100, ул. Литовская, д. 2; (812) 416-53-17; [email protected]

Prof. Alexander M. Korolyuk, DMedSci, Head Dept. of Microbiology, Virology and Immunology, St-Petersburg State Pediatric Medical University; 2 Litovskaya street, St Petersburg, 194100; E-mail: [email protected]

Официально в РФ регистрируются только нежелательные побочные реакции на прививку вакциной БЦЖ, при кожных аллергических пробах такая практика отсутствует. Мы не нашли публикаций о каких-либо непредусмотренных официальными документами побочных реакциях гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ) на пробу с Диаскинтестом. В отличие от упоминаний о подобных случаях применительно к пробе Манту.

Целью данного сообщения является представление и обсуждение 5 зарегистрированных нежелательных реакций ГНТ после кожной пробы с Диаскинтестом, наблюдавшихся одним из авторов во втором полугодии 2015 года. Есть основание полагать, что в действительности такие реакции встречаются значительно чаще, но по каким-то причинам не выносятся на обсуждение.

Ниже приводим выписки из амбулаторных карт. Все дети перед постановкой кожных проб были осмотрены врачом-фтизиатром туберкулезного диспансера, противопоказания отсутствовали.

4. Пациенту Р. 5 лет 14.12.2015 проведена проба с Диаскинтестом. К вечеру повысилась температура тела до

Как трактовать приведенные эпизоды, какова их природа и есть ли вероятность более серьезных нежелательных последствий пробы с Диаскинтестом?

Нам представляется, что повышение температуры до достаточно высокого уровня (39°С) следует считать чрезмерной реакцией.

В трех из пяти описанных случаев проба Манту и проба с Диаскинтестом проводились одновременно (номера 2, 3, 5). После пробы Манту побочных местных реакций у детей зафиксировано не было, в то время как у всех троих детей вскоре после введения пробы с Диаскинтестом (через 1—3 часа) на руке образовался обширный болезненный отек с гиперемией, а у мальчика О. (№3) появились герпетиформные пузырьковые высыпания. Однако методика проведения пробы Манту и пробы с Диаскинтестом на двух руках официально рекомендована фтизиатрам.

У остальных детей побочные реакции были только на пробу с Диаскинтестом без дополнительных факторов. Во всех пяти случаях они возникали в интервале от 1 до 12 часов, их интенсивность постепенно возрастала. Отеки и гиперемия сохранялись от 4 до 6 дней. Все это позволяет отнести их к не опасным для жизни реакциям гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ).

У четырех (№№ 1 —4) из пяти детей через 72 часа наблюдалась большего размера, чем обычно, зона гиперемии вокруг инфильтратов на Диаскинтест. Размер инфильтратов был умеренным. Избыточная гиперемия, ве-

роятно, связана с местными немедленными реакциями в первый день после пробы.

Очевидна связь между возникновением нежелательных реакций и введением в кожу аллергена туберкулезного рекомбинантного (Диаскинтеста) на основе генно-инженерного гибридного белка кишечной палочки ESAT6/ CFP10. Согласно описанию молекулярных биологов, разработавших этот препарат, слитый белок получен после трансфекции химерной плазмиды pQE30-ESAT6-CFP10 в штамм E.coli DLT1270. После выделения рекомбинантный белок лиофилизировали и хранили при 4°С [2].

6. Кисличкин Н.Н., Ленхеррр-Ильина Т.В., Красильников И.В. Диагностика туберкулеза. Туберкулин и группа препаратов на основе белков ESAT-6/CFP-10 // Инфекционные болезни. 2016. Т. 14, № 1. С. 48—54.

Kislichkin N.N., Lenherrr-Ilina T., Krasilnikov I.V. TB-diagnosis. Tuberculin and a group of drugs based on proteins ESAT-6 / CFP-10 // Infectious Diseases. 2016, V. 14, № 1. Р. 48—54. (In Russ).

9. Aggerbeck H., Madsen S.M. Safety of ESAT-6 // Tuberculosis, 2006; 86: 363-373.

11. Froeschle J.E., Frederick L.R., Bloh A.M. Immediate hypersensitivity reactions after use of tuberculin skin testing // Clinical Infectious Diseases, Volume 2002, 34, Issue 1, P. e12—e13.

12. Youssef E., Wooltorton E. Serious allergic reactions following tuberculin skin tests // CMAJ (Canadian Medical Association Journal), July 5, 2005, Vol. 173, no. 1 doi: 10.1503/cmaj.050710.

13. Coombs R., Gell P. The classification of allergic reactions underlying diseases. In: P.G.H. Gell, R.R.A. Coombs (Eds.) Clinical Aspects of Immunology. Blackwell Scientific Publications, Oxford, 1963, р. 217—237.

14. Клинические рекомендации. Аллергология / под ред. Хаитова Р.М., Ильиной Н.И. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 206. — 240 с. [Clinical guidelines. Allergology] / ed. Haitov R.M., Ilyina N.I. — M.: GEOTAR Media, 2006. — 240 р. (In Russ).

15. Manual Allergy and Immunology (3-e edition) / Edited by Lawlor. G. Jr., Fisher T., Adelman D. Little, Brown and Company/ — Boston/New York/Toronto/London/ 1995/ — 806 p.

Роль метапневмовируса и бокавируса в развитии острых респираторных инфекций у госпитализированных больных в эпидсезоны 2011—2014 гг. в Пензенской области

И. А. Малова1, И. П. Баранова2

ФГБУЗ Медико-санитарная часть № 59 ФМБА России1, ГБОУ ДПО Пензенский институт усовершенствования врачей Министерства здравоохранения Российской Федерации2

В статье представлены результаты сравнительного анализа клинических данных, лабораторных и инструментальных методов исследования у пациентов с бокавирусной и метапневмовирусной инфекциями, госпитализированных в инфекционное отделе-

Читайте также: